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Problème HPLC

cocotte2000 3 messages postés Posté le : 23/02/2010, 10:28 (Lu 15850 fois) Bonjour à tous, j'ai un petit (peut être très gros problème): j'utilise une colonne C18, un détecteur UV à barrettes de diode et l'éluant est actuellement du méthanol, j'obtiens en visualisation instantanée uniquement pour le passage du MeOH hors injection aucune ligne de base mais un profil tout autre: que des pics verticaux très serrés sans retour à 0. Je suppose qu'il y a un souci mais je ne sais pas lequel et donc je ne sais pas comment le régler. Si quelqu'un a une idée et surtout une solution à ce problème merci d'avance.

Re: Problème HPLC [70768]

darrigan Modérateur 2872 messages postés Posté le : 23/02/2010, 11:32 (Lu 15846 fois) Aurais-tu un scan à nous montrer ?

Re: Problème HPLC [70794]

darrigan Modérateur 2872 messages postés Posté le : 23/02/2010, 19:41 (Lu 15798 fois) Une image serait utile pour pouvoir te répondre !

Re: Problème HPLC [70795]

nobelios 1214 messages postés Posté le : 23/02/2010, 19:47 (Lu 15796 fois) C'est vrai qu'on aimerai beaucoup avoir un chromatogramme pour t'aider car sans on est dans le noir complet :!

Re: Problème HPLC [70772]

Kevin Modérateur tournant 238 messages postés Posté le : 23/02/2010, 13:55 (Lu 15840 fois) c'est un éluant beaucoup trop polaire. Tu devrais recondtionner ta colonne, il est possible qu'il y ai plein de crasses dessus (as tu changé la précolonne?) Docteur en Chimie organique de Synthèse / Electrochimie organique

Re: Problème HPLC [70781]

cocotte2000 3 messages postés Posté le : 23/02/2010, 15:18 (Lu 15826 fois) merci pour ta réponse, effectivement on m'avait conseillé d'effectuer un lavage de la colonne au MeOH en circuit ouvert, ce que j'ai fait pendant 2h à un débit de 3ml/min et effectivement le résultat était meilleur ensuite tout en gardant un bruit de fond plus important qu'auparavant; pour la précolonne, elle est neuve.

Re: Problème HPLC [70783]

Kevin Modérateur tournant 238 messages postés Posté le : 23/02/2010, 15:51 (Lu 15820 fois) pas de problème de pression non constante? Docteur en Chimie organique de Synthèse / Electrochimie organique

Re: Problème HPLC [70784]

cocotte2000 3 messages postés Posté le : 23/02/2010, 16:02 (Lu 15817 fois) si effectivement et pas moyen d'y remédier, ça oscille de 3 à 4mbar à chaque fois voir plus

Re: Problème HPLC [70788]

Kevin Modérateur tournant 238 messages postés Posté le : 23/02/2010, 17:33 (Lu 15811 fois) un problème de pompe peut etre.... Docteur en Chimie organique de Synthèse / Electrochimie organique

Re: Problème HPLC [70793]

nobelios 1214 messages postés Posté le : 23/02/2010, 19:40 (Lu 15800 fois) Le septum est encore bon ? La colonne n'est pas cassée (colonne capilaire) ? Les raccord sont-il étanches ? C'est des problèmes qui arrivent souvent chez nous.

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