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Problème HPLC [70766]

cocotte2000

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3 messages postés


Posté le : 23/02/2010, 10:28 (Lu 15992 fois)

Bonjour à tous,
j'ai un petit (peut être très gros problème): j'utilise une colonne C18, un détecteur UV à barrettes de diode et l'éluant est actuellement du méthanol, j'obtiens en visualisation instantanée uniquement pour le passage du MeOH hors injection aucune ligne de base mais un profil tout autre: que des pics verticaux très serrés sans retour à 0. Je suppose qu'il y a un souci mais je ne sais pas lequel et donc je ne sais pas comment le régler. Si quelqu'un a une idée et surtout une solution à ce problème merci d'avance.

Re: Problème HPLC [70768]

darrigan
Modérateur

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2872 messages postés


Posté le : 23/02/2010, 11:32 (Lu 15988 fois)

Aurais-tu un scan à nous montrer ?

Re: Problème HPLC [70794]

darrigan
Modérateur

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2872 messages postés


Posté le : 23/02/2010, 19:41 (Lu 15940 fois)

Une image serait utile pour pouvoir te répondre !

Re: Problème HPLC [70795]

nobelios

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1214 messages postés


Posté le : 23/02/2010, 19:47 (Lu 15938 fois)

C'est vrai qu'on aimerai beaucoup avoir un chromatogramme pour t'aider car sans on est dans le noir complet :!

Re: Problème HPLC [70772]

Kevin
Modérateur tournant

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238 messages postés


Posté le : 23/02/2010, 13:55 (Lu 15982 fois)

c'est un éluant beaucoup trop polaire.

Tu devrais recondtionner ta colonne, il est possible qu'il y ai plein de crasses dessus (as tu changé la précolonne?)


Docteur en Chimie organique de Synthèse / Electrochimie organique

Re: Problème HPLC [70781]

cocotte2000

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3 messages postés


Posté le : 23/02/2010, 15:18 (Lu 15968 fois)

merci pour ta réponse,
effectivement on m'avait conseillé d'effectuer un lavage de la colonne au MeOH en circuit ouvert, ce que j'ai fait pendant 2h à un débit de 3ml/min et effectivement le résultat était meilleur ensuite tout en gardant un bruit de fond plus important qu'auparavant; pour la précolonne, elle est neuve.

Re: Problème HPLC [70783]

Kevin
Modérateur tournant

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238 messages postés


Posté le : 23/02/2010, 15:51 (Lu 15962 fois)

pas de problème de pression non constante?


Docteur en Chimie organique de Synthèse / Electrochimie organique

Re: Problème HPLC

cocotte2000

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3 messages postés


Posté le : 23/02/2010, 16:02 (Lu 15959 fois)

si effectivement et pas moyen d'y remédier, ça oscille de 3 à 4mbar à chaque fois voir plus

Re: Problème HPLC [70788]

Kevin
Modérateur tournant

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238 messages postés


Posté le : 23/02/2010, 17:33 (Lu 15953 fois)

un problème de pompe peut etre....


Docteur en Chimie organique de Synthèse / Electrochimie organique

Re: Problème HPLC [70793]

nobelios

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1214 messages postés


Posté le : 23/02/2010, 19:40 (Lu 15942 fois)

Le septum est encore bon ? La colonne n'est pas cassée (colonne capilaire) ? Les raccord sont-il étanches ? C'est des problèmes qui arrivent souvent chez nous.

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