| hplc [68997] |
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| Posté le : 16/11/2009, 13:38 (Lu 12943 fois) |
Commentaire : dhplc (hétéroduplexes homoduplexes) ADN
Bonjour,
Je suis actuellement en stage et j'aimerai avoir des renseignements concernant l'élution de l'ADN.
La colonne utilisé est constituée de polystyrène, elle est non poreuse et hydrophobe.
On utilise du TEAA une molécule amphiphile (hydrophobe et chargé +) pour créer un lien avec l'ADN que l'on veut éluer chargé - .
J'aimerai savoir comment l'acétonitrile (éluant) fragilise les hétéroduplexes et s'il s'accrcroche à la colonne ou pas?
Je voudrai aussi savoir pourquoi l'absorbance est en mV pour l'utilisation d'un détecteur UV?
Merci d'avoir lu :) et merci d'avance pour vos réponses.
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| Re: hplc |
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| Posté le : 16/11/2009, 14:21 (Lu 12939 fois) |
Pour le détecteur UV j'ai la même chose au labo c'est juste parceque le signal que donne le détecteur est une ddp donc en mV mais cela doit être proportionnel à l'absorbance.
Pour l'acétonitrile il doit faire des interaction dipôle-dipôle et ainsi perturber les liaisons hydrogènes entre les paires de bases.
Pour ce qui est de s'accrocher à la colonne je ne pense pas, vu que la phase fixe est en polystyrene tu as des interactions de type hydrophobe et pi-stacking avec les structures aromatique des brin d'ADN.
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Associé de recherche en chimie médicinale (Bac+5) |
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| Re: hplc [69000] |
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| Posté le : 16/11/2009, 16:04 (Lu 12935 fois) |
Merci beaucoup pour tes réponses, elles m'ont bien aidées :) .
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| Re: hplc [69004] |
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| Posté le : 16/11/2009, 18:36 (Lu 12921 fois) |
Houlà ! dites, c'est de la haute voltige là ! 
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| Re: hplc [69015] |
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| Posté le : 16/11/2009, 21:05 (Lu 12896 fois) |
Merci Clovis c'est un plaisir ! 
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Associé de recherche en chimie médicinale (Bac+5) |
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| Re: hplc [69005] |
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| Posté le : 16/11/2009, 18:39 (Lu 12920 fois) |
en figure double hélicoïdale la voltige non ?
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| Re: hplc [69006] |
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| Posté le : 16/11/2009, 18:44 (Lu 12918 fois) |
bon ok c'était nul ... je me tais 
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| Re: hplc [69013] |
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| Posté le : 16/11/2009, 20:33 (Lu 12905 fois) |
Rebonjour,
Oui j'avoue que je connaissais pas les interactions entre les cycles aromatiques ^^ surtout le nom, je sais pas si il faut que je le dise ou pas dans le rapport c'est peut être trop poussé ^^ .
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| Re: hplc [69014] |
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| Posté le : 16/11/2009, 21:03 (Lu 12898 fois) |
Bah le pi-stacking c'est niveau BAC+1-2 donc c'est toi qui vois...
Allé juste pour toi : http://en.wikipedia.org/wiki/Pi_stacking
J'espère que tu maitrise un peu la langue de Shakespeare! Ya des chose intéressantes pour toi dans cet article.
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Associé de recherche en chimie médicinale (Bac+5) |
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